Kromatografi lajur klasik
2. lajur kromatografi (jenis putaran)
3. lajur kromatografi (manual)
*** Senarai harga untuk keseluruhan di atas, tanya kami untuk mendapatkan
Description/kawalan
Parameter teknikal
Kromatografi lajur klasikadalah teknik pemisahan asas yang digunakan secara meluas dalam kimia dan biokimia untuk komponen pembersihan dan mengasingkan dari campuran . ia beroperasi pada prinsip pembahagian bahan pembahagian antara fasa pegun yang dibungkus dalam lajur dan fasa mudah alih yang mengalir melalui .
Fasa pegun, biasanya penyerap pepejal seperti gel silika atau alumina, dikemas dengan ketat ke dalam lajur kaca atau plastik . campuran sampel diperkenalkan di bahagian atas lajur, diikuti dengan penambahan fasa mudah alih-A Ciri -ciri kimia, seperti polariti, saiz, dan pertalian untuk penyerap .
Sebatian dengan interaksi yang lebih kuat dengan bergerak fasa pegun bergerak lebih perlahan melalui lajur, manakala mereka yang mempunyai interaksi yang lebih lemah bergerak lebih cepat . penghijrahan pembezaan ini menghasilkan pemisahan campuran ke dalam band atau pecahan yang berbeza, yang dapat dikumpulkan secara individu .
Ia dinilai untuk kesederhanaan, fleksibiliti, dan keberkesanan kosnya . Ia sesuai untuk kedua-dua pemisahan skala analisis, untuk mengenal pasti dan mengukur komponen, dan pemisahan berskala preparatif, untuk mendapatkan lebih banyak bahan-bahan yang lebih besar daripada Pelbagai aplikasi .
Parameter
Prinsip asas
|
|
Kromatografi lajur klasik, Juga dikenali sebagai kromatografi pepejal cecair, adalah teknik untuk memisahkan larutan berdasarkan perbezaan di antara fasa pegun (biasanya penyerap pepejal) dan fasa mudah alih (pelarut) . Prinsip asas dapat diringkaskan seperti berikut: Koefisien pengedaran yang berbeza antara fasa tetap dan fasa mudah alih . Dalam kromatografi lajur, fasa pegun biasanya terdiri daripada bahan zarahan berliang (seperti gel silika, alumina, karbon yang diaktifkan, dan lain -lain .), yang mempunyai kawasan permukaan yang besar dan pusat penjerapan, dan boleh membentuk ikatan hidrogen dengan molekul} Molekul larut dari fasa pegun, dan pemilihannya harus ditentukan mengikut polaritas larut dan ciri -ciri penjerapan penyerap . Dalam proses pemisahan, larutan campuran diperkenalkan ke dalam lajur yang mengandungi fasa pegun . dengan aliran fasa mudah alih, komponen bergerak ke bawah lajur pada kelajuan yang berbeza kerana kapasiti penjerapan yang berlainan fasa pegun {{1} Polariti mudah dibawa oleh fasa mudah alih, dan kelajuan bergerak lebih cepat . dengan cara ini, setiap komponen membentuk beberapa jalur warna pada lajur untuk mencapai pemisahan . |
Analisis asid amino
Analisis asid amino biasanya dilakukan menggunakan kromatografi cecair, di manaKromatografi lajur klasikadalah teknik yang biasa digunakan . Dalam kaedah ini, resin pertukaran ion digunakan sebagai fasa pegun untuk memisahkan asid amino mengikut perbezaan caj elektrik . asid amino mungkin perlu ditukar kepada bentuk yang lebih dapat dikesan oleh derivatisasi sebelum sampel memasuki lajur {{2} lajur kromatografi .
- Penyediaan sampel: Sampel protein dihidrolisiskan kepada asid amino . Ini dapat dicapai oleh hidrolisis asid atau hidrolisis enzimatik . sampel yang dihidrolisis perlu menjalani pra-rawatan yang betul, seperti penyingkiran sisa protein {}
- Derivatisasi: Untuk meningkatkan sensitiviti pengesanan analisis asid amino dan ciri -ciri pemilihan pemisahan, derivatisasi asid amino sering diperlukan . Terdapat dua jenis derivasi asid amino: derivasi lajur pra -phen. chlorofluorene (fmoc-ci), phenyl isothiocyanate (pitc), Dansyl chloride (dansyl-ci), 2, 4- dinitrofluorobenzene (fdnb), dan lain-lain .
- Pemilihan lajur: Pilih lajur yang sesuai untuk analisis asid amino, seperti lajur pertukaran ion, lajur C18, lajur C8, dan lain -lain .
- Tetapan Keadaan Kromatografi: Tetapkan keadaan kromatografi yang sesuai, termasuk fasa mudah alih, kadar aliran, program kecerunan, dan lain -lain . fasa mudah alih biasa termasuk buffer yang mengandungi pasangan ion, seperti buffer formate .
- Analisis sampel: Sampel selepas hidrolisis dan derivatisasi disuntik ke dalam kromatografi untuk analisis . dengan membandingkan kawasan puncak dan kepekatan setiap asid amino dalam sampel pada lengkung standard, kandungan asid amino dalam sampel boleh dianalisis secara kuantitatif .
- Pemprosesan Data: Menurut kawasan puncak dan data tumpuan yang diperoleh dari analisis, kandungan setiap asid amino dalam sampel dikira, dan data diproses dan hasilnya dilaporkan .
Terdapat banyak contoh aplikasi dalam analisis asid amino, dan beberapa kes tertentu disenaraikan di bawah:
- Pengesanan asid amino penting: Penggunaan dapat mengesan kandungan asid amino penting, seperti isoleucine, leucine, lysine, dan lain -lain . asid amino ini memainkan peranan penting dalam tubuh manusia dan penting untuk mengekalkan aktiviti penting dan kesihatan .
- Penentuan Asid Amino Dalam Perubatan Cina: Dalam analisis perubatan Cina, ia juga digunakan secara meluas untuk menentukan kandungan asid amino dalam ubat -ubatan Cina . sebagai contoh, apabila menentukan kandungan paeoniflorin di wuji baifeng pil, asid .
- Penentuan asid amino dalam makanan: Kandungan asid amino dalam makanan juga merupakan salah satu kawasan aplikasi penting . sebagai contoh, dalam penentuan nukleotida dalam makanan bayi dan produk tenusu, lima nukleotida dalam cannek atau ditentukan oleh {1} Tentukan kandungan asid amino dalam makanan lain, yang memberikan asas penting untuk kawalan kualiti makanan dan penilaian pemakanan .
Dalam analisis asid amino, adalah perlu untuk memilih reagen derivatisasi yang sesuai dan keadaan derivatisasi untuk meningkatkan kepekaan dan ketepatan pengesanan .
Pilihan lajur dan penetapan keadaan kromatografi mempunyai kesan penting terhadap kesan pemisahan dan perlu dioptimumkan mengikut sampel tertentu dan keperluan analisis .
Dalam proses analisis, adalah perlu untuk memberi perhatian kepada keadaan penyediaan dan penyimpanan sampel untuk mengelakkan pengaruh pencemaran sampel dan degradasi pada hasil analisis .
Apakah rawatan derivatif
Derivatisasi adalah teknik pretreatment sampel penting dalamKromatografi lajur klasik, yang bertujuan untuk meningkatkan prestasi pengesanan dan kesan pemisahan analisis . Berikut adalah penjelasan terperinci mengenai proses derivatisasi:
|
► Tujuan rawatan derivatif 1) Prestasi pengesanan yang lebih baik: Dengan memperkenalkan kumpulan berfungsi yang mudah dikesan, analit menghasilkan isyarat yang lebih kuat pada pengesan, meningkatkan kepekaan dan ketepatan pengesanan . |
|
|
|
► Jenis rawatan derivatif 1) Derivasi pra-lajur: |
|
Derivasi pasca lajur mempunyai kelebihan kebolehulangan yang baik dan kurang mempengaruhi faktor, tetapi ia memerlukan instrumen dan peralatan tambahan . 1) Kepekaan pengesanan yang lebih baik: Sebagai contoh, dalam analisis asid amino, pengenalan kumpulan fungsi yang mudah dikesan (seperti fluorophores) melalui derivatisasi pra-lajur dapat meningkatkan kekuatan isyarat asid amino pada pengesan, dengan itu meningkatkan kepekaan pengesanan . |
|
Kromatografi lajur klasik, Teknik asas dalam sains pemisahan, terus berkembang dengan kemajuan dalam bahan dan metodologi, memastikan kaitannya dalam aplikasi penyelidikan dan perindustrian .
Satu arah yang menjanjikan ialah integrasi fasa pegun baru . inovasi dalam sains bahan telah membawa kepada pembangunan bahan pembungkusan berprestasi tinggi dengan selektiviti, kestabilan, dan kecekapan yang dipertingkatkan {{2} Bioteknologi .
Tambahan pula, ia semakin digabungkan dengan teknik pengesanan lanjutan, seperti spektrometri massa, untuk meningkatkan sensitiviti dan ketepatan . hibridisasi ini membolehkan analisis yang lebih komprehensif mengenai campuran kompleks, memperluaskan kebolehgunaan teknik dalam bidang seperti metabolomik dan proteomik {}}
Kesimpulannya, masa depan terletak pada penyesuaiannya dengan bahan-bahan baru, pengurangan, dan integrasi dengan kaedah pengesanan canggih, memastikan utiliti berterusannya dalam landskap saintifik dan industri moden .
Cool tags: Kromatografi Lajur Klasik, China Klasik Klasik Kromatografi Pengilang, Pembekal, Kilang
Sepasang
Kromatografi lajur konvensionalSeterusnya
Kromatografi lajur oksida aluminiumHantar pertanyaan
