Ketahui mengenai lajur kromatografi makmal

Thelajur kromatografiTeknik pemisahan didasarkan pada pekali partition yang berlainan antara fasa tetap dan fasa mudah alih dalam campuran. Fasa pegun biasanya merupakan penyerap, seperti gel silika, alumina, poliamida, dan lain -lain, yang sama rata di dalam lajur kromatografi. Fasa mudah alih adalah pelarut yang membawa campuran ke dalam lajur kromatografi, yang juga dikenali sebagai eluen. Apabila fasa mudah alih bergerak dalam lajur kromatografi, setiap komponen tetap pada fasa tetap untuk masa yang berlainan kerana perbezaan pekali partition, untuk mencapai pemisahan.

Sebagai alat pemisahan penting, lajur kromatografi makmal memainkan peranan penting dalam bidang kimia, biologi, farmaseutikal dan lain -lain. Berdasarkan prinsip kromatografi, pemisahan setiap komponen dalam campuran dapat direalisasikan dengan berkesan dengan menggunakan perbezaan pekali partition, kapasiti penjerapan dan kelarutan bahan yang berlainan antara fasa tetap dan fasa mudah alih. Makalah ini akan memperkenalkan prinsip asas, jenis, kaedah pemilihan, prosedur operasi dan aplikasi dalam pelbagai bidang lajur kromatografi makmal secara terperinci.

Lajur kromatografi makmal boleh dibahagikan kepada banyak jenis mengikut prinsip tindakan mereka, bahan pengisian, bentuk dan saiz.

◆ Klasifikasi mengikut prinsip tindakan

1) Kromatografi lajur penjerapan: Penyerap digunakan untuk memisahkan perbezaan kapasiti penjerapan setiap komponen campuran. Pilihan penyerap bergantung kepada sifat bahan yang dipisahkan, seperti gel silika sesuai untuk pemisahan sebatian bukan polar dan kutub, dan alumina sesuai untuk pelbagai jenis sebatian mengikut asid dan alkali.

2) Kromatografi lajur partition: Campuran dipisahkan mengikut perbezaan pekali partition antara fasa tetap dan mudah alih. Kromatografi lajur partition biasanya menggunakan sistem pelarut sebagai fasa mudah alih dan menyesuaikan pekali partition dengan mengubah komposisi pelarut.

3) Kromatografi lajur pertukaran ion: Penyerapan selektif dan pelepasan ion dalam campuran dipisahkan oleh resin pertukaran ion. Resin pertukaran ion mempunyai kumpulan pertukaran ion tertentu yang boleh menukar ion dalam bahan yang dipisahkan.

◆ Sort dengan mengisi bahan

1) Lajur gel silika: gel silika adalah penjerap yang biasa digunakan, sesuai untuk pemisahan pelbagai bahan organik. Lajur silikon mempunyai kestabilan terma dan kimia yang sangat baik dan boleh digunakan dalam pelbagai pH yang luas.

2) Lajur Alumina: Lajur alumina dibahagikan kepada lajur alumina berasid, alkali dan neutral mengikut asid dan alkali, sesuai untuk pelbagai jenis pemisahan kompaun. Lajur Alumina mempunyai kapasiti penjerapan yang kuat untuk bahan kutub.

3) Lajur poliamida: Lajur poliamida mempunyai fungsi kromatografi penjerapan dan kromatografi partition, dan sesuai untuk pemisahan sebatian yang boleh membentuk ikatan hidrogen dengan poliamida, seperti fenol, asid, quinones, dan lain -lain.

◆ Sort mengikut bentuk dan saiz

1) Lajur kaca: Jenis lajur kromatografi yang biasa digunakan di makmal, dengan kelebihan ketelusan dan pemerhatian mudah. Saiz lajur kaca ditentukan mengikut jumlah bahan yang akan dipisahkan dan tahap kesukaran pemisahan, dan nisbah diameter ke ketinggian umumnya antara 1: 8 dan 1:50.

2) Lajur keluli tahan karat: Lajur keluli tahan karat mempunyai kelebihan rintangan kakisan dan rintangan tekanan, yang sesuai untuk sistem kromatografi tekanan tinggi. Penggunaan lajur keluli tahan karat agak jarang berlaku, tetapi mempunyai kelebihan dalam keadaan tertentu.

Pemilihan lajur kromatografi yang sesuai adalah penting untuk mencapai pemisahan yang berkesan. Apabila memilih lajur kromatografi, faktor berikut perlu dipertimbangkan:

Lajur kromatografi makmal mempunyai pelbagai aplikasi dalam beberapa bidang, termasuk tetapi tidak terhad kepada yang berikut:

◆ Pemisahan dan pemurnian protein: Lajur kromatografi adalah salah satu alat penting untuk pemisahan dan pemurnian protein. Mengikut perbezaan saiz protein, caj harta dan pertalian, kaedah kromatografi yang berbeza boleh dipilih untuk pemisahan dan pemurnian. Sebagai contoh, kromatografi lajur pertukaran ion sesuai untuk protein yang dipisahkan oleh sifat caj; Kromatografi lajur Affinity menggunakan sifat mengikat khusus untuk mengasingkan dan membersihkan protein sasaran.

◆ Pemisahan asid nukleik: Lajur kromatografi juga boleh digunakan untuk pemisahan asid nukleik. Melalui kaedah kromatografi tertentu, molekul asid nukleik panjang dan struktur yang berbeza (seperti serpihan DNA dan molekul RNA) boleh dipisahkan dengan berkesan dalam lajur untuk memenuhi keperluan analisis asid nukleik berikutnya, penjujukan dan eksperimen lain.

◆ Pemisahan sebatian molekul kecil: Perantaraan dadah, komponen molekul kecil dalam produk semulajadi, dan lain -lain, boleh dipisahkan dengan bantuan lajur kromatografi. Mengikut perbezaan pekali partition antara fasa tetap dan fasa mudah alih, kaedah kromatografi yang sesuai boleh dipilih untuk pemisahan dan pemurnian sebatian molekul kecil. Sebagai contoh, gel silika fasa terbalik sesuai untuk pemisahan molekul kecil lipophilic; Gel silika biasa sesuai untuk pemisahan molekul kecil hidrofilik.

◆ Pemisahan pecahan polysaccharides: Lajur kromatografi boleh digunakan untuk pemisahan pecahan polysaccharides. Menurut saiz molekul polysaccharide dan struktur rantai bercabang, teknik kromatografi yang sesuai boleh dipilih untuk memisahkan campuran polysaccharide ke tahap yang berbeza, yang berguna untuk mengkaji selanjutnya hubungan antara struktur dan fungsi polysaccharides.

◆ Aplikasi lain: Lajur kromatografi juga digunakan secara meluas dalam pemisahan dan pengekstrakan produk intraselular selepas kerosakan sel, pemisahan dan pemurnian komponen aktif dalam ekstrak tumbuhan, pemisahan dan pemurnian antibiotik, pemisahan dan pembersihan enzim, pembersihan antibodi, dan pemisahan dan kepekatan virus. Di samping itu, lajur kromatografi juga memainkan peranan penting dalam pemisahan dan analisis produk petrokimia, pemisahan dan pengesanan bahan tambahan makanan, pemisahan dan pemurnian bahan mentah kosmetik, analisis klasifikasi bahan polimer dan pemisahan dan pemurnian rempah -rempah semulajadi.