Aplikasi Analisis HPLC dalam Rotary Evaporator

Kromatografi cecair prestasi tinggi (HPLC) juga dipanggil kromatografi cecair tekanan tinggi, kromatografi cecair berkelajuan tinggi, kromatografi cecair resolusi tinggi dan kromatografi lajur moden. Ia adalah teknologi pemisahan analitik yang cekap dan pantas yang dibangunkan dengan pesat pada tahun 1970-an, dan ia merupakan kaedah penting dalam ujian pemisahan moden.

Kromatografi cecair berprestasi tinggi (HPLC) menggunakan cecair sebagai fasa mudah alih, dan mengguna pakai sistem infusi tekanan tinggi untuk mengepam fasa mudah alih seperti pelarut tunggal dengan kekutuban yang berbeza atau pelarut campuran dan larutan penimbal dengan perkadaran yang berbeza ke dalam lajur kromatografi dengan fasa pegun. Selepas komponen dalam lajur dipisahkan, mereka memasuki pengesan untuk pengesanan, untuk merealisasikan analisis sampel.

Mekanisme pemisahan kromatografi cecair prestasi tinggi adalah sama seperti kromatografi lajur konvensional, tetapi pembungkusan lebih halus dan perlu ditolak oleh pam tekanan tinggi, yang mempunyai kecekapan lajur yang tinggi dan kelajuan analisis yang cepat. Berbeza daripada kromatografi gas, fasa mudah alih dalam kromatografi cecair turut mengambil bahagian dalam proses pengasingan komponen, dan komposisi, perkadaran dan nilai pHnya boleh dilaraskan secara fleksibel, dengan pelbagai mod pengasingan. Dalam amalan, nilai pengekalan dan selektiviti sampel dalam lajur kromatografi dilaraskan dengan menukar komposisi fasa mudah alih, supaya sampel yang berbeza boleh diasingkan.

 

Komponen analisis HPLC

 

Kolum: Lajur ialah komponen teras sistem HPLC, yang digunakan untuk memisahkan sebatian dalam sampel. Lajur pemisahan biasa termasuk lajur fasa terbalik, lajur pertukaran ion, lajur penapisan gel, dsb., dan pemilihannya bergantung pada sifat sebatian yang akan diasingkan dan tujuan analisis.

Fasa Mudah Alih: Fasa mudah alih ialah gabungan pelarut yang digunakan dalam HPLC untuk menghantar sampel melalui lajur pemisahan. Fasa bergerak biasanya terdiri daripada campuran pelarut, yang boleh menjadi pelarut tunggal atau campuran berbilang pelarut dalam perkadaran tertentu. Memilih aliran yang sesuai adalah sangat penting untuk kesan pemisahan.

Pam: Pam digunakan untuk menyediakan fasa bergerak dan menolaknya melalui lajur pemisah pada tekanan tertentu. Pam biasa termasuk pam tekanan malar dan pam kecerunan. Pam kecerunan boleh merealisasikan perubahan linear atau bukan linear komposisi fasa mudah alih, untuk mendapatkan kesan pemisahan yang lebih baik.

Penyuntik: Penyuntik digunakan untuk memperkenalkan sampel untuk dianalisis ke dalam sistem HPLC. Pensampel boleh menjadi picagari yang dikendalikan secara manual atau pensampel automatik. Mereka biasanya mempunyai ciri kelantangan yang tepat dan kebolehulangan yang baik untuk memastikan suntikan sampel yang tepat.

Ketuhar Lajur: Ketuhar lajur digunakan untuk mengawal suhu lajur pemisah. Dengan mengawal suhu, pekali pengedaran dan kelajuan pemisahan sampel dalam lajur boleh diubah, sekali gus mengoptimumkan kesan pemisahan.

Pengesan: Pengesan digunakan untuk mengesan sebatian yang dipisahkan dan menjana isyarat elektrik yang berkaitan dengan kepekatannya. Pengesan biasa termasuk pengesan penyerapan yang boleh dilihat ultraviolet, pengesan pendarfluor dan pengesan elektrokimia. Pilihan pengesan bergantung pada ciri-ciri kompaun yang akan dianalisis dan keperluan sensitiviti pengesanan.

Sistem Pemerolehan Data: Sistem pemerolehan data digunakan untuk menerima, merekod dan menganalisis keluaran isyarat oleh pengesan. Ia boleh menukar isyarat yang dikesan kepada parameter seperti kawasan puncak dan masa pengekalan, dan menyediakan analisis dan tafsiran keputusan.

 

Selepas pelarut dikeluarkan olehpenyejat berputar, sampel yang diperoleh biasanya pekat atau pepejal. Jika anda ingin menganalisis lebih lanjut atau mengesan sebatian dalam sampel, anda boleh menganalisisnya dengan kromatografi cecair prestasi tinggi (HPLC).

Langkah am untuk menganalisis sampel selepas penyejatan berputar oleh HPLC

 

1. Pembubaran sampel: larutkan sampel selepas penyejatan berputar dalam pelarut yang sesuai. Keterlarutan bahan yang akan dianalisis dan keperluan keadaan analisis HPLC perlu diambil kira semasa memilih pelarut.

2. Penyediaan penyelesaian piawai: Jika analisis kuantitatif diperlukan, larutan piawai sebatian yang akan diuji boleh disediakan untuk pembetulan dan pengiraan keputusan analisis seterusnya.

3. Jalankan analisis HPLC: suntikan sampel ke dalam sistem HPLC dan sediakan lajur pemisah, fasa mudah alih dan pengesan yang sesuai. Mengikut tujuan analisis, pilih kaedah dan parameter yang sesuai, seperti kadar aliran, suhu dan program kecerunan.

4. Pengumpulan dan analisis data: kromatogram sampel dikumpul oleh sistem HPLC, dan kompaun sasaran dikira atau dikenal pasti mengikut kawasan puncak, masa pengekalan atau parameter lain yang berkaitan. Kaedah keluk piawai dan kaedah piawai dalaman boleh digunakan untuk analisis kuantitatif.

5. Tafsiran Keputusan: Mengikut keputusan analisis, sebatian dalam sampel dinilai secara kualitatif dan kuantitatif. Mengikut keperluan, anda boleh menjana laporan atau hasil analisis rekod.

 

Aplikasi rotovap dalam analisis HPLC mempunyai dua makna praktikal

 

• Kepekatan sampel: Dalam sesetengah kes, kepekatan sampel yang akan dianalisis mungkin terlalu rendah, jadi penyejat berputar kimia boleh digunakan untuk menumpukan sampel untuk meningkatkan sensitiviti pengesanan analit dalam HPLC.
• Penyingkiran pelarut: Dalam sesetengah sampel, pelarut mungkin mengganggu analisis HPLC, jadi adalah perlu untuk mengeluarkan atau menggantikan pelarut dalam sampel dengan pelarut yang sesuai untuk HPLC. Penyejat berputar makmal boleh membantu mengeluarkan pelarut dan mengubah sampel ke dalam bentuk yang sesuai untuk analisis HPLC.

 

Analisis HPLC danpenyejat berputaradalah dua teknik yang biasa digunakan dalam analisis kimia, dan ia mempunyai beberapa perbezaan dan sambungan dari segi prinsip dan aplikasi.

 

Beza

 

Prinsip: HPLC adalah berdasarkan prinsip kromatografi cecair, dan pemisahan dan analisis kuantitatif direalisasikan oleh interaksi antara fasa pegun (lajur) dan fasa bergerak (pelarut). Penyejat menggunakan prinsip pemanasan dan putaran untuk menyejat sampel cecair dengan cepat dan mengeluarkan pelarut, supaya dapat menumpukan sampel atau menukar persekitaran pelarut sampel.

Medan permohonan: HPLC digunakan secara meluas dalam kimia, farmasi, alam sekitar dan bidang lain, dan boleh digunakan untuk pengasingan, pengenalpastian dan analisis kuantitatif sebatian dalam campuran kompleks; Penyejatan berputar digunakan terutamanya dalam proses kepekatan sampel, penyingkiran pelarut dan penyediaan sampel, dan biasanya digunakan dalam sintesis organik, pengekstrakan produk semula jadi, penyediaan sampel dan bidang lain.

Kepantasan analisis: Analisis HPLC biasanya mengambil masa yang lama untuk memisahkan dan mengesan sampel, yang mungkin mengambil masa beberapa minit hingga beberapa jam; Unit penyejat berputar vakum boleh menyejat sampel cecair dengan cepat dalam masa yang singkat, biasanya hanya mengambil masa beberapa minit.

 

Sambung

 

Rawatan sampel: Peralatan penyejat berputar sering digunakan untuk menumpukan sampel atau mengeluarkan pelarut semasa penyediaan sampel untuk membuat sampel sesuai untuk kaedah analisis lanjut, seperti HPLC. Kesan dan ketepatan analisis HPLC boleh dipertingkatkan dengan menumpukan sampel dan mengeluarkan pelarut dengan penyejat berputar.

Pemilihan pelarut: Dalam analisis HPLC, pilihan pelarut adalah sangat penting untuk kesan pemisahan; Thepenyejat berputarboleh membantu mengeluarkan pelarut daripada sampel dan mengubah sampel ke dalam bentuk yang sesuai untuk analisis HPLC. Oleh itu, penyejat berputar boleh menyediakan keadaan pelarut yang memuaskan untuk analisis HPLC.

 

Kami menyediakan rotovap angkat manual dan rotovap angkat elektrik, sila hubungi kamisales@achievechem.comuntuk menyesuaikan mesin penyejat berputar anda sendiri.